Rapidcal.Immuno脱钙液

近年来血液病呈高发趋势，骨髓穿刺活检更广泛地应用于临床。骨髓活检制片及免疫组化的质量，对骨髓病理诊断起着极其重要的作用。为此，我们选用美国进口的Rapidcal.Immuno脱钙剂对临床骨髓活检标本进行脱钙、制片及做相应的免疫组化染色，结果显示其具有脱钙迅速、组织损害极小、并有效保留了细胞的免疫原性的特征。

1 材料与方法

选自病理科近一年来的骨髓活检标本30例，均为 Bouin固定液，固定>12h。将固定后骨髓标本从中间处分成两段，采用下面不同方式脱钙，脱钙液均大于标本体积4倍。一段选用常规8%硝酸室温脱钙2h。另外一段选用美国Lymed公司生产专利产品Rapidcal.Immuno室温脱钙2h。所有脱钙后标本均置于流水中冲洗10min，常规脱水、透明、浸蜡及包埋切片，进行HE及免疫组化染色。标记物为CD3、CD4、CD79a和CD20，常规高压修复，Polymer法检测，DAB显色（以上试剂均购自北京中杉金桥生物技术有限公司）。

2 结果

Rapidcal.Immuno脱钙处理的骨髓标本，易于2?m连续完整切片，镜下结构清晰，细胞核与浆颜色鲜艳；常规硝酸脱钙的骨髓标本，镜下细胞核与浆颜色对比不明显，染色质不清晰。免疫组化实验中，Rapidcal.Immuno脱钙处理的骨髓标本，CD3、CD4、CD79a、CD20所标记的T细胞和B细胞定位准确，阳性表达强，背景清晰。常规硝酸脱钙的骨髓标本，抗原部分丢失，标记物阳性结果表达较弱，背景有部分非特异性着色。

3 讨论

目前，常用的化学脱钙方法有强酸、螯合剂等。螯合剂多为乙烯二胺四乙酸，其性质温和，pH値近中性，但其脱钙时间较长，多在40h以上，不适宜病理科常规骨髓活检标本。强酸如：盐酸、硝酸等可以快速有效的去除骨髓组织中钙盐，脱钙时间短，但虽经流水冲洗，残留的酸性物质不利于细胞核着色，核浆对比不清晰，不利于形态学观察。此外细胞表面抗原是蛋白分子，强酸会引起蛋白分子结构发生改变，抗原表位发生丢失，而使免疫组化染色结果灵敏度降低，影响病理诊断。

Rapidcal.Immuno主要成分为矿物酸及缓冲液。具有螯合剂及强酸脱钙剂的优势，脱钙迅速有效，骨髓穿刺标本1-2h即可达到良好脱钙效果。突出特点是这种脱钙剂中的矿物酸与缓冲液的配合，避免了对造血细胞表面蛋白的破坏，最大限度的保留了细胞的免疫原性，并保留大部分抗原表位，对造血细胞中CD系列标记物的检测，灵敏性及特异性高，明显优于强酸处理的骨髓标本，为病理诊断提供了可靠依据。（目录编号：ZLI-9307 进口脱钙液）

HE差

HE好

免疫组化CD79a差

免疫组化CD79a好