编号:FISH-0200

产品名称:

荧光原位杂交样品处理试剂盒

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详细信息:
分类:常用抗体
子分类:荧光原位杂交
规格:5次/盒
检验方法:1、切片脱蜡
1) 二甲苯脱蜡,10分钟×3次;
2) 100%乙醇,5分钟×2次;
3) 室温晾干或45-50℃热平台烤片2~5分钟。
2、预处理
1) 将切片置于80℃预热的预处理液(50ml/缸)中12±2分钟;实验步骤
注意:预处理液应该提前预热。预热时倒入预处理液的立式染缸需先放置于水浴中,才能打开水浴锅的电源,并注意水浴锅中的水位应高于立式染缸中的液面。
2) 将切片置于室温纯水中3分钟。
3、酶消化
1) 从纯水中取出切片,小心擦去组织边缘多余水分,注意不要损伤组织;
2) 将切片置于37℃预热的酶消化液中15分钟(按照组织类型自行控制消化时间在10-60分钟之间);
注意:应提前配制酶消化液并预热。试剂盒中提供有酶储存液和酶稀释液,临用前 1 小时混合即可。
3) 将切片拿出放置室温纯水中3分钟;
4) 自然晾干或45-50℃热平台上放置2~5分钟。
4、脱水
1) 70%乙醇,室温1分钟;
2) 85%乙醇,室温1分钟;
3) 100%乙醇,室温1分钟;
4) 小心擦去多余乙醇,注意不要损伤组织;
5) 自然晾干或45-50℃热平台上放置2~5分钟。
5、变性杂交
按照荧光原位杂交探针的供应商提供的说明书进行。
6、杂交后冲洗
1) 在立式染缸中倒入50毫升的洗脱液Ⅰ,放入水浴中加热,至少在使用前30分钟加热至74±1℃,可用一天,用后弃去;
注意:所测温度是指立式染缸中洗脱液的内部温度。
2) 在另一个立式染缸中倒入50毫升洗脱液Ⅱ,室温放置,可用一天,用后弃去;
3) 用镊子小心去掉盖玻片周围的橡胶水泥;
4) 将切片置于室温的洗脱液Ⅱ中,待盖玻片自行脱落(约2~5分钟),可上下提拉数次;
5) 将切片置于74±1℃的洗脱液Ⅰ中,轻轻摇动1~3秒,重复另一张片子;
6) 放置2分钟;
注意: 每次最多放置6张切片。
7) 取出切片,擦去多余液体,竖直放置,避光晾干。
7、复染封片
按照荧光原位杂交探针的供应商提供的说明书进行。
预期用途:临床上用于荧光原位杂交(FISH)检测过程中的样本处理。
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